重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建和在脊髓内表达的实验研究

• 作者: 侯铁胜 傅强 李明 柴延丰 路长林 陈哲宇 鲁凯伍
• 来源期刊: 中国神经科学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胶质细胞源性神经营养因子 逆转录-聚合酶链反应 融合蛋白 阳离子脂质体 转染
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 226-229
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|Q786
• 字数: 3113字
• 语种: 英文

摘要

采用RT-PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA,并以融合蛋白方式克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体中,成功构建了重组质粒pEGFP-GDNF在体表达载体.采用基因注射法将阳离子脂质体DC-Chol和pEGFP-GDNF基因混合后转染至大鼠胸段脊髓组织中,观察GDNF在大鼠脊髓中的表达.RT-PCR结果表明注射局部GDNF mRNA表达增加.荧光显微镜下观察发现,注射局部灰质和白质神经细胞内均有较多绿色荧光蛋白表达.本研究结果提示,阳离子脂质体介导GDNF体内转基因的方法是可行的,EGFP可作为报告基因观察GDNF在体内的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯铁胜	第二军医大学长海医院骨科	193	1880	21.0	31.0
2	李明	第二军医大学长海医院骨科	268	1810	20.0	27.0
3	陈哲宇	第二军医大学神经生物学教研室	38	218	8.0	12.0
4	路长林	第二军医大学神经生物学教研室	98	695	13.0	21.0
5	傅强	第二军医大学长海医院骨科	97	1069	17.0	27.0
6	鲁凯伍	第二军医大学长海医院骨科	29	415	11.0	19.0
7	柴延丰	第二军医大学神经生物学教研室	2	16	2.0	2.0