抗CEA抗体可变区基因的克隆及其嵌合抗体的表达

• 作者: 冉宇靓 刘军 孔健 孙立新 杨治华 遇珑 陈凤
• 来源期刊: 实用肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 真核细胞 嵌合体 抗体 癌胚抗原 基因表达
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 基础与临床研究
• 页码范围: 82-86
• 页数: 5页
• 分类号: R73-35
• 字数: 3546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1692.2001.02.004

摘要

目的在真核细胞中表达抗癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)人-鼠嵌合抗体.方法从分泌抗CEA鼠单抗C50的杂交瘤细胞中扩增、克隆可变区基因.测序鉴定后连入真核表达载体,导入二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(dihydrofolate reductase-deficient Chinese hamster ovary,CHO-dhfr)细胞进行表达.采用间接和竞争抑制ELISA检测表达产物的人源性和抗原结合特异性.结果序列测定初步确定所克隆的是功能性抗体可变区基因.在转染细胞上清中测到抗CEA嵌合抗体的表达.ELISA试验证实该嵌合抗体具有人的恒定区,并与原鼠单抗C50有相同的抗原结合特异性.结论成功地在真核细胞中表达了抗CEA人-鼠嵌合抗体.