恶性疟原虫海南FCC1/HN株CSP抗CSP抗原基因在Hela细胞中表达产物的免疫应答研究

• 作者: Fang Zheng 余新炳 刘彦文 方政
• 来源期刊: 中华医学杂志(英文版)
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 环子孢子蛋白 免疫应答
• 年，卷（期）: 2001,（8）
• 页码范围: 844-847
• 页数: 4页
• 分类号: R53
• 语种: 英文
• DOI: 10.3760/j.issn:0366-6999.2001.08.015

摘要

目的本课题利用含人类巨细胞病毒(CMV)的高效启动子和增强子的pcDNA3质粒作为载体，在人宫颈癌细胞(Hela)中高效表达恶性疟原虫环子孢子蛋白(CSP)，观察其表达产物诱导BALB/c小鼠的免疫应答水平。 方法从我国恶性疟原虫海南FCC1/HN株基因组中特异扩增CSP基因；将其定向克隆到真核表达质粒pcDNA3的CMV启动子下游，构建重组质粒pcDNA3-PfCSP,并导入Hela细胞；分离和纯化表达蛋白，并将其免疫接种BALB/c小鼠；通过ELISA、Dot-ELISA、Western blot分析、T淋巴细胞增殖试验、自然杀伤(NK)细胞活性检测、T淋巴细胞亚群测定，观察其诱导BALB/c小鼠产生体液免疫和细胞免疫的应答水平。 结果免疫后的小鼠产生高效价的特异性抗体反应，ELISA检测抗体滴度达1∶6400;Western blot结果在38.3?kDa相应位置处出现较清晰的显色条带。小鼠脾淋巴细胞转化试验结果显示，且表达蛋白抗原刺激免疫鼠和正常鼠测得OD值分别为0.34±0.04和0.12±0.03，两者之间差异显著(P<0.01)。用MTT比色分析法检测小鼠NK细胞活性，免疫鼠NK细胞活性明显高于正常鼠(P<0.05)。用间接免疫荧光法测定免疫鼠淋巴细胞亚群，结果表明其CD4+、CD8+T细胞数与正常鼠相比，均明显增多，经t检验差异显著(P<0.05)。 结论恶性疟原虫FCC1/NH株CSP基因表达产物能特异性刺激BALB/c小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫反应，并有提高小鼠NK细胞活性的作用，增强其抗感染的免疫应答能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山医科大学寄生虫学研究所	101	467	11.0	17.0
2	方政	南通医学院寄生虫学教研室	9	19	2.0	4.0
3	刘彦文	中山医科大学寄生虫学研究所	11	51	5.0	7.0