抗血小板多肽在大肠杆菌中的克隆和表达

• 作者: 查艳萍 秦永文 穆瑞斌 荆清
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因重组 表达及纯化 大肠杆菌 GPⅡb/Ⅲa拮抗剂 GST-KGDX融合蛋白 抗血小板作用
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 3803字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2002.01.003

摘要

设计合成了两条编码KGDX(赖-甘-天冬-X)的寡核苷酸链,长度为36个碱基对,两端分别为BamHI酶和XcoI酶切位点.将该基因插入原核高效表达载体PGEX-4T-1的tac启动子下游,获得重组质粒PGEX-4T-1KGDX,转化大肠杆菌DH5a,37℃诱导使重组子表达.GST-KGDX融合蛋白具有可溶性,产量为35mg/L培养基,表达量占菌体总蛋白48.02%.破碎菌体上清经谷胱甘肽-琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯度为95%的重组蛋白.125I7E3竞争拮抗实验结果表明,GST无GPⅡb/Ⅲa结合作用,GST-KGD融合蛋白能代替7E3竞争性地与GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合,从而抑制血小板聚集.其IC50值为40μmol/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦永文	第二军医大学长海医院心内科	411	2004	19.0	26.0
2	荆清	第二军医大学长海医院心内科	18	66	5.0	7.0
3	查艳萍	第二军医大学长海医院心内科	5	16	3.0	3.0
4	穆瑞斌	第二军医大学长海医院心内科	5	21	3.0	4.0