牛金属硫蛋白素bMTcin编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究

• 作者: 刘变芳 唐兴芳 李元瑞 袁静
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛金属硫蛋白素bMTein PCR pGEM-T载体 基因克隆 DNA序列分析 pGEX4T-1 大肠杆菌 亲和层析 SDS-PAGE GST : bMTcin
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 页码范围: 28-31,87
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 2510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2002.04.009

摘要

以本实验室由RT-PCR扩增得到的含有牛金属硫蛋白(bMT)cDNA的重组质粒pYJ101为模板,PCR扩增出牛金属硫蛋白素bMTcin的编码区,将其克隆到pGEM-T载体上并进行DNA序列测定.利用融合表达载体pGEX4T-1,在E.coli中诱导表达bMTcin,经过Glutathine Sepharose 4B亲和层析纯化后,SDS-PAGE检测GST:bMTcin的条带.结果表明,所克隆的bMTcin序列全长为141bp,其DNA序列与原模板中的序列完全相同,与GenBank中另外5个bMTcin DNA相比,第31位和86位与ConneeIy的序列为A和G,导致第11位(Thr)和29位(Arg)的氨基酸不同于其他4个序列(11位为Ala,29位为Lys).融合表达产物亲和层析纯化后,用SDS-PAGE检测可见融合蛋白GST : bMTcin的条带,紫外分光光度计测定,融合蛋白GST:bMTcin的表达量大约为1.1 mg/L发酵液.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李元瑞	西北农林科技大学食品科学与工程学院	81	1975	27.0	41.0
2	袁静	西北农林科技大学食品科学与工程学院	17	203	8.0	14.0
3	唐兴芳	西北农林科技大学食品科学与工程学院	6	14	3.0	3.0
4	刘变芳	西北农林科技大学食品科学与工程学院	27	123	6.0	10.0