携带入VEGF165的腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘志祥 周芳 王家宁 王崇全 陈霞平 黄永章
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 腺病毒 基因治疗
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 实研研究
• 页码范围: 156-158
• 页数: 3页
• 分类号: Q789|R446.5
• 字数: 2478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2002.03.010

摘要

目的构建携带人血管内皮生长因子(VEGF)165基因的重组腺病毒载体,用于治疗重症冠心病.方法将人VEGF165 cDNA正向插入到穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下,构建重组质粒,即pAd-hVEGF165,通过脂质体与pJM17共转染293细胞,经同源重组获得携带人VEGF165基因的重组腺病毒载体Ad-hVEGF165.通过PCR扩增法鉴别Ad-hVEGF165,根据A260nm计算病毒滴度.结果人VEGF165 cDNA成功地正向插入到pHCMVSP1A载体中,以重组病毒基因组DNA为模板,同时扩增出了576 bp的VEGF165 cDNA基因片段和860 bp的腺病毒骨架基因片段,证实了Ad-hVEGF165的正确性.测病毒滴度为1.94×1012 pfu/ml.结论携带人VEGF165的腺病毒载体的成功构建为用VEGF165基因治疗冠心病奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王崇全	十堰市大和医院心血管内科	1	7	1.0	1.0
2	王家宁	十堰市大和医院心血管内科	1	7	1.0	1.0
3	黄永章	十堰市大和医院生命科学研究所	1	7	1.0	1.0
4	陈霞平	十堰市大和医院生命科学研究所	1	7	1.0	1.0
5	刘志祥	十堰市大和医院生命科学研究所	1	7	1.0	1.0
6	周芳	十堰市大和医院生命科学研究所	1	7	1.0	1.0