幽门螺杆菌Mr 26 000外膜蛋白编码基因的克隆及表达

• 作者: 姜政 王丕龙 蒲丹 陶小红 黄爱龙
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 外膜蛋白基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 376-379
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R37
• 字数: 3896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.04.021

摘要

目的构建含幽门螺杆菌(Hp)Mr 26 000外膜蛋白编码基因的重组载体,并在E. coli BL21中表达.方法用PCR从Hp染色体中,扩增Mr 26 000外膜蛋白编码基因片段.将目的基因与pET32a(+)同时经BamH I、Hind Ⅲ双酶切、纯化、连接后,构建含有目的基因的重组载体.以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL21(DE30)并表达.表达产物经纯化后,用ELISA法检测其抗原性.结果经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp Mr 26 000的外膜蛋白编码基因,与Tomb等的报道相比较,有1.1%的bp发生变异,1.51%的氨基酸残基改变.经SDS-PAGE分析发现,融合基因表达的蛋白Mr为46×103,可溶性表达产物占细菌总蛋白的38.96%.重组蛋白经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上.ELISA法检测显示,该重组蛋白可被Hp阳性患者的血清所识别,具有良好的抗原性.结论成功地克隆并表达Mr为26 000的Hp外膜蛋白编码基因,为Hp蛋白疫苗的研制和快速诊断试剂盒的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙	重庆医科大学第一附属医院消化科	151	971	16.0	24.0
2	蒲丹	重庆医科大学第一附属医院消化科	22	154	7.0	12.0
3	黄爱龙	重庆医科大学病毒性肝炎研究所	236	1190	16.0	23.0
4	陶小红	重庆医科大学第一附属医院消化科	82	426	11.0	16.0
5	姜政	重庆医科大学第一附属医院消化科	117	472	10.0	15.0