伊氏锥虫HGPRT基因cDNA的克隆及其在E.coli中的表达

• 作者: 刘全 王祥生
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 伊氏锥虫 HGPRT 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 597-599
• 页数: 3页
• 分类号: S852.7
• 字数: 1757字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2003.06.016

摘要

根据引物设计的一般原则,参照伊氏锥虫HGPRT基因的核苷酸序列设计、合成一对引物,PCR扩增伊氏锥虫HGPRT基因cDNA.低熔点琼脂糖回收PCR产物,并将其克隆至pGEM-T Easy载体中,经酶切、PCR鉴定和序列分析,获得重组中间质粒pGEM/HGPRT.重组中间质粒pGEM/HGPRT经Nco Ⅰ和SalⅠ双酶切,回收目的片段HGPRT,以非融合形式插入原核表达质粒pBV220构建表达质粒pBV/HGPRT,转化大肠杆菌DH5a,42℃诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳和薄层扫描分析,表达产物HGPRT的分子量约为23 kD,与理论推算值相符,表达率占总菌体蛋白的19%,经间接ELISA检测,表达产物能被伊氏锥虫阳性血清所识别.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘全	解放军军需大学军事兽医研究所	24	130	5.0	10.0
2	王祥生	解放军军需大学军事兽医研究所	10	52	3.0	7.0