蝎形引物PCR快速检测环境水样中沙门菌方法研究

• 作者: 宋伟民 蒋蓉芳 谢晓东
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 蝎形引物 快速检测 沙门菌 PCR
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 115-119
• 页数: 5页
• 分类号: R114
• 字数: 5827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3617.2003.02.014

摘要

[目的] 以蝎形引物PCR技术为基础建立一套环境水样沙门菌的快速检测方法.[方法] 选择沙门菌himA基因设计出以荧光素(FAM)和淬灭物(DABCYL)双标记探针的茎环尾状结构构成蝎形引物,对8种沙门菌和8种非沙门菌经增菌、DNA提取后,以蝎形引物PCR方法进行检测,探讨该检测方法的可行性、特异性和灵敏度,并与普通引物PCR法检测50份环境水样进行比较.[结果] 蝎形引物PCR方法检测沙门菌,细菌密度与荧光相对强度存在着量比关系,与普通引物PCR法比较,具有快速、特异、灵敏度高的特点,在50 μl PCR反应体系中最低可检出2 cfu沙门菌.[结论] 沙门菌蝎形引物在PCR扩增中,探针可特异地与目的DNA片段杂交,使DABCYL不能有效地淬灭FAM产生的荧光,荧光可经仪器直读检出.所建立的快速检测方法可定性或定量的用于环境水样中沙门菌检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋伟民	复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室	111	1534	22.0	35.0
2	蒋蓉芳	复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室	38	275	9.0	15.0
3	谢晓东	复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室	3	31	3.0	3.0