幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建

• 作者: 付亚萍 姜云水 方平楚 朱诚
• 来源期刊: 科技通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物工程 幽门螺杆菌 cagA基因 CTB基因 水稻Wx启动子 基因融合 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 页码范围: 189-193
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 3182字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7119.2004.03.003

摘要

目的构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM-CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3'端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBIA1300的表达框架内.结果 PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBIA1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱诚	浙江大学生命科学学院	47	1579	21.0	39.0
2	付亚萍	中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室	7	153	6.0	7.0
3	方平楚	浙江大学医学院病原生物学研究所	18	100	6.0	9.0
4	姜云水	浙江大学医学院病原生物学研究所	5	50	3.0	5.0