shRNA表达载体构建方法的优化

• 作者: Tong-Chuan He 唐霓 张君 张秉强 闫歌 陶鹏 黄爱龙
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 发夹状RNA(shRNA) 退火方法
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 47-49
• 页数: 3页
• 分类号: Q3
• 字数: 2308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-5464.2004.06.012

摘要

目的探讨shRNA表达载体的构建方法,以加速RNA干扰研究的进程.方法对shRNA表达载体的构建过程进行分析和监测,并加以优化.结果发现shRNA表达载体构建的退火过程容易产生障碍,经优化退火缓冲液的NaCl含量后,能明显提高退火效率及shRNA表达载体构建的成功率.结论shRNA表达载体构建的退火过程需加以关注,退火缓冲液中NaCl含量应提高至200mmol/L以上为宜.