利用pET-29b载体进行葡激酶基因表达与其产物的亲和纯化

• 作者: 吴樱 周加文 甘一如 黄鹤
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡糖激酶 重组蛋白质类/生物合成 重组融合蛋白质类/分离和纯化 组氨酸 色谱法,亲和 色谱法,凝胶
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 865-867,877
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2004.06.009

摘要

目的:探讨6聚组氨酸序列与葡激酶基因序列融合表达及其表达产物的纯化方法.方法:将葡激酶的cDNA序列连入pET-29b质粒,转入E.coli BL21(DE3)进行表达.应用镍金属离子螯合层析及凝胶过滤层析法纯化表达产物,采用溶圈法对纯化产物进行生物学活性测定.结果:6聚组氨酸与葡激酶的可溶性融合蛋白在BL21(DE3)中的表达量约占菌体可溶性蛋白总量的25%;螯合层析纯化后其纯度可达90%以上;再应用Sephacryl S-200HR可使其纯度提高到98%以上;测得其比活性为5.0×10 4 AU·mg -1 .结论:利用pET-29b载体成功进行了重组葡激酶基因的表达及其表达产物的亲和纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄鹤	天津大学化工学院生物工程系	21	140	8.0	11.0
2	甘一如	天津大学化工学院生物工程系	42	391	13.0	17.0
3	吴樱	天津大学化工学院生物工程系	2	6	1.0	2.0
4	周加文	吉林大学中日联谊医院妇产科	1	6	1.0	1.0