人β2-微球蛋白在pET-22b(+)表达载体中的克隆、表达与纯化

• 作者: 何豫 张恒辉 朴文花 朴桂花 李在琉 王贵强 许文燮
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β2-M pET-22b(+)载体 表达 纯化 四聚体
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 99-101
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2739字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人β2-microglobulin(β2-M)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达β2-M蛋白质并进行纯化,为构建MHC-肽四聚体奠定基础.方法:从人外周血单核细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出去除信号肽部分的β2-M基因,克隆pET-22b(+)表达载体进行诱导表达.采用离子交换层析和凝胶过滤方法对表达产物进行纯化,用ELISA和Western blot法进行免疫学鉴定.结果:成功地构建了表达载体pET-22b(+)-β2-M,对表达产物进行了纯化,并对表达产物进行了鉴定.结论:获得β2-M蛋白的高效表达,为进一步利用亲和素在体外构建MHC-Ⅰ类分子肽四聚体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王贵强	北京大学第一医院感染科	133	768	16.0	23.0
2	张恒辉	北京大学第一医院感染科	18	171	8.0	12.0
3	何豫	北京大学第一医院感染科	5	52	4.0	5.0