hCu,Zn-SOD-TAT PTD的融合表达及其跨膜转运性质的初步研究

• 作者: 宋礼华 桂向东 汪飞鹏
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: SOD-TATPTD融合蛋白 原核表达 蛋白转导
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 11-15
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2004.01.003

摘要

HIV-I反式激活蛋白TAT中的一段富含碱性氨基酸的短序列具有独特的跨膜转运能力,被称为TAT蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD).从人肺cDNA文库中PCR扩增hCu,Zn-SOD基因,插入pUC19测序;以测序质粒为模板,再用含TAT PTD编码序列的3'引物PCR扩增得hCu,Zn-SOD-TATPTD融合基因,并插入pUC19.将SOD基因和SOD-TAT PTD融合基因分别亚克隆至温控表达载体pJW2,转化大肠杆菌DH5α.SDS-PAGE和Western blot结果表明,热击诱导4h后,分别在19 ku和22 ku处出现SOD和SOD-TAT PTID目标表达条带,表达蛋白以包含体形式存在.分别提取SOD和SOD-TAT PTD包含体,复性纯化后SOD和SOD-PTD重组蛋白均具有特异的SOD酶活性,其比活性分别为12×103 NU/mg和9.9×103 NU/mg.细胞试验结果表明,与SOD相比较,SOD-TAT PTD融合蛋白能显著提高细胞内SOD酶活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋礼华	安徽安科生物工程股份有限公司研究发展中心	31	188	7.0	12.0
5	汪飞鹏	安徽安科生物工程股份有限公司研究发展中心	2	8	2.0	2.0
7	桂向东	安徽安科生物工程股份有限公司研究发展中心	2	8	2.0	2.0