绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

• 作者: 刘丹 杨贵贞 盛军
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 HBsAg 融合蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 68-70
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 1631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2004.02.002

摘要

目的构建绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因的载体,并检测其在COS-7细胞中的表达.方法采用PCR获得HBsAg基因;利用该基因片段和质粒pEGFP 3.1的HindⅢ/ KpnⅠ限制性酶切位点构建融合表达载体pGHBs 3.1;通过脂质体介导的方法将该载体转染到COS-7细胞中,用PCR法检测基因转染,ELISA检测HBsAg的瞬时表达,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达.结果融合表达载体pGHBs 3.1转染COS-7细胞后,在细胞中检测到HBsAg基因片段,转染细胞培养上清中检测到HBsAg表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达.结论表达载体pGHBs 3.1在COS-7细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有HBsAg和绿色荧光蛋白的双重活性,该载体可用绿色荧光蛋白作为报告基因观察HBsAg的表达及定位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丹	吉林大学基础医学院免疫教研室	92	252	9.0	11.0
2	杨贵贞	吉林大学基础医学院免疫教研室	43	379	10.0	18.0
3	盛军		50	270	9.0	13.0