幽门螺杆菌粘附素hpa A和霍乱毒素B亚单位ctx B融合基因的原核表达

• 作者: 吴利先 杨致邦
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 粘附素 霍乱毒素 融合基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 270-273
• 页数: 4页
• 分类号: R394
• 字数: 2503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2004.05.005

摘要

目的构建幽门螺杆菌粘附素(hpa A)和霍乱毒素B亚单位(ctx B)融合基因的原核表达载体,诱导表达并进行纯化.方法用PCR扩增hpa A和ctx B两个目的基因片段,克隆至同一pQE-30表达载体中,构建含双基因的表达质粒pQE-hct,转化E.coli DH5α,经IPTG诱导表达融合蛋白HCT;经Western blot分析其免疫原性,采用镍离子柱进行纯化.结果经测序HCT融合基因片段由1161 bp组成,为编码387个氨基酸残基的多肽.经SDS-PAGE分析相对分子质量约为40000.可溶性蛋白占菌体总蛋白的25%以上,经亲和层析后可获得纯度为92%以上的重组融合蛋白.经Western blot检测可被Hp全菌抗血清和CT抗血清识别.结论已成功构建融合蛋白HCT的原核表达载体并能高效表达,为研制Hp口服疫苗提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦	重庆医科大学微生物学教研室	119	522	12.0	17.0
2	吴利先	重庆医科大学微生物学教研室	14	56	4.0	7.0