霍乱毒素ctxA基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘德松 张莉 张雷 王涛 田玉 陈建平
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌 霍乱毒素A亚基基因(ctxA) 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 675-678
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3053字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.05.004

摘要

目的 构建霍乱毒素A亚基基因(ctxA)的融合表达载体,并在原核细胞中表达,为霍乱弧菌肠毒素A亚基(CTA)免疫原性的研究及其作为免疫佐剂的研究提供基础.方法 以霍乱弧菌DNA为模板,PCR扩增获得霍乱弧菌ctxA基因,与带有硫氧还蛋白(Trx)基因的高效原核表达质粒pET32a(+)定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-CTA融合蛋白, 用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定.结果 限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,我们扩增出了霍乱弧菌787 bp的ctxA基因,成功构建了重组质粒pET-ctxA,经SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒pET-ctxA在原核细胞中得到了高效融合表达.结论 霍乱弧菌ctxA基因在大肠杆菌中得到了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莉	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	183	1016	13.0	26.0
2	张雷	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	27	78	5.0	7.0
3	陈建平	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	78	217	7.0	9.0
4	王涛	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	151	897	15.0	23.0
5	刘德松	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	5	15	2.0	3.0
6	田玉	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	20	69	5.0	6.0