应用PCR技术对先天性长QT综合征KCNQ1基因进行定点突变的研究

• 作者: 任法鑫 康彩练 张守焰 李伟 杨钧国
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 医学
• 关键词: 长QT综合征 KCNQ1 PCR 定点突变
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 589-593
• 页数: 5页
• 分类号: R394
• 字数: 4095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2004.05.005

摘要

利用聚合酶链反应(PCR)技术对长QT综合征(LQTS)KCNQ1基因进行定点突变的研究.首先设计两对引物(包含预定的突变),通过3轮PCR扩增,扩增出含有所需突变位点的片段,然后将片段克隆入T载体中,通过酶切连接的方法将突变点引入到pIRES2-EGFP-KCNQ1中,随后用Effectene转染试剂介导转染HEK293细胞.结果在真核表达载体pIRES2-EGFP-KCNQ1基础上获得了KCNQ1 cDNA C934T的突变体,测序表明在序列中发生了预期的突变.将含突变点的pIRES2-EGFP-KCNQ1转染HEK293细胞后,在荧光显微镜下观察到被转染的HEK293细胞发出绿色荧光,表明含突变点的pIRES2-EGFP-KCNQ1得到了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李伟	华中科技大学同济医学院心血管病研究所	180	1273	20.0	29.0
2	杨钧国	华中科技大学同济医学院心血管病研究所	33	192	8.0	12.0
3	张守焰	华中科技大学同济医学院心血管病研究所	8	35	3.0	5.0
4	康彩练	华中科技大学同济医学院心血管病研究所	3	25	2.0	3.0
5	任法鑫	华中科技大学同济医学院心血管病研究所	3	16	1.0	3.0