经DNA改组的植酸酶纯化和酶学性质

• 作者: 储炬 姚泉洪 孙军 庄英萍 张嗣良 彭日荷 郭美锦
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA改组 植酸酶 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 页码范围: 766-770
• 页数: 5页
• 分类号: Q555
• 字数: 5210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-687X.2004.06.019

摘要

经DNA改组的重组植酸酶通过有机膜超滤、DEAE-Sepharose F.F 离子交换层析两步纯化,其纯度可达90%左右.SDS-PAGE分析表明,重组植酸酶的分子量Mr约为85 000.酶学实验结果表明:该酶反应最适pH为4.5,最适温度为40 ℃,Km为0.11 mmol L-1, Vmax为964 mmol L-1min-1,植酸酶活性不依赖任何金属离子的存在.向酶液中分别添加MgSO4、阿拉伯糖、果糖、半乳糖、乳糖、海藻糖、蔗糖及葡萄糖(100 g/L)后,植酸酶在90 ℃处理10 min的活性比对照增加了1～3倍,说明这些物质为酶保护剂;在37 ℃下以植酸钠为底物的SDS对酶活性具有强烈的抑制作用;金属离子如Cu2+, Zn2+, K+以及EDTA对酶活性具有较弱抑制作用;金属离子如Mn2+, Mg2+、Fe2+、Ba2+、Ca2+、Co2+低浓度时对酶活性有促进作用,当Mg2+浓度增加到10 mmol L-1时,则对酶活性起抑制效应. 图4 表4 参19