MAGE-n的原核表达与分离纯化

• 作者: 叶菁 张秀敏 董海龙 陈广生 隋延仿 黄亚渝
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤抗原-n 原核表达 纯化 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 103-105,109
• 页数: 4页
• 分类号: R735
• 字数: 2786字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2004.02.006

摘要

目的构建MAGE-n的原核表达质粒,在大肠杆菌中进行表达,并通过谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferse,GST)纯化系统进行分离纯化.方法用ANTHEPROT V5.0软件预测MAGE-n的生物学特性,从中选择抗原性及特异性较强的一段.利用PCR方法扩增MAGE-n基因片段,连入原核表达载体pGEX-4T-1,构建MAGE-n的原核表达质粒pGEX-MAGE-n并测序.将该质粒转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化.结果成功地扩增了MAGE-n基因片段,测序结果表明与GenBank公布的序列一致,成功地构建了pGEX-MAGE-n原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达一Mr约为43 000的蛋白,经GST融合蛋白纯化系统纯化,得到了MAGE-n的重组蛋白.结论首次获得了新的肿瘤抗原MAGE-n的重组蛋白,并进行分离纯化,为进一步研究MAGE-n抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董海龙	第四军医大学基础部病理学教研室	105	699	16.0	22.0
2	隋延仿	第四军医大学基础部病理学教研室	88	384	10.0	13.0
3	张秀敏	第四军医大学基础部病理学教研室	53	243	8.0	11.0
4	黄亚渝	第四军医大学基础部病理学教研室	28	78	5.0	6.0
5	陈广生	第四军医大学基础部病理学教研室	46	197	8.0	10.0
6	叶菁	第四军医大学基础部病理学教研室	79	357	10.0	13.0