幽门螺杆菌细胞空泡毒素毒性片段基因的表达及其重组蛋白免疫学鉴定

• 作者: 刘淼 杨致邦 江宝玲 汪学龙 沈际佳
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 克隆,分子 空泡 螺杆菌,幽门/遗传学
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 495-498
• 页数: 4页
• 分类号: R341|R377|R394.3
• 字数: 3356字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2005.06.002

摘要

目的采用基因工程技术获得具有良好免疫反应性的重组细胞空泡毒素的毒性亚单位蛋白.方法利用PCR技术从Hp基因组中扩增VacA基因毒性片段,插入原核表达载体pQE30上,测序后,转化表达宿主菌DH5α,SDS-PAGE分析表达情况,Western blot检测其免疫反应性.Ni-NTA2+树脂纯化后,用重组蛋白免疫兔,Helico Blot试剂盒检测兔血清VacA抗体以鉴定其免疫原性.结果测序表明目的序列完整,与Genbank中的多株中国菌株相比有高度的同源性.SDS-PAGE显示表达产物相对分子量为27 000,表达量为30%以上.该蛋白可被Hp全菌抗血清所识别,纯化后可得到纯度为93%以上蛋白质,并证实有良好的免疫原性.结论 Hp VacA基因毒性片段表达成功,获得高纯度重组蛋白并具有良好的免疫反应性与免疫原性,为研制疫苗和制备诊断VacA(+)株感染试剂盒提供了可靠材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦	重庆医科大学微生物学教研室	119	522	12.0	17.0
2	沈际佳	安徽医科大学病原生物学教研室	84	364	10.0	14.0
3	汪学龙	安徽医科大学病原生物学教研室	113	471	11.0	16.0
4	刘淼	安徽医科大学病原生物学教研室	39	98	6.0	7.0
5	江宝玲	安徽医科大学病原生物学教研室	11	94	6.0	9.0