中国对虾素在大肠杆菌(Escherichia coli)中的重组表达

• 作者: 康翠洁 王金星 相建海 薛剑峰 赵小凡
• 来源期刊: 海洋与湖沼
• 学科: 生物学
• 关键词: 中国对虾 抗菌肽 对虾素 pGEX-4T-1
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 页码范围: 235-240
• 页数: 6页
• 分类号: Q95
• 字数: 3954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0029-814X.2005.03.007

摘要

中国对虾素是从中国对虾血细胞中克隆得到的一种抗菌肽.为了进一步研究中国对虾素(CHP)的功能并为制备特异性抗体作准备,采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,进行了对虾素原核表达的研究.根据从中国对虾血细胞中克隆得到的对虾素基因设计特异性引物扩增中国对虾素成熟肽基因(Chp),插入原核表达载体pGEX-4T-1中,在E.coli BL21表达融合蛋白GST-CHP.结果表明,不同表达菌株的融合蛋白表达量为30%-34%,同一菌株在诱导5h后能达到最高表达量.利用GST亲和层析纯化融合蛋白,将融合蛋白用凝血酶裂解以得到CHP,其分子量约为5.6kDa,N-端测序结果与期望的成熟对虾肽序列一致.用液体生长抑制方法检测活性,表明重组GST-CHP蛋白及CHP均表现出对大肠杆菌的抑菌活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵小凡	山东大学生命科学学院	50	618	13.0	24.0
2	王金星	山东大学生命科学学院	53	698	15.0	25.0
3	相建海	中国科学院海洋研究所	125	2734	33.0	47.0
4	康翠洁	山东大学生命科学学院	7	110	4.0	7.0
5	薛剑峰	山东大学生命科学学院	1	16	1.0	1.0