东亚钳蝎毒素BmαTX14的基因组克隆、真核表达纯化及功能的初步研究

• 作者: 吕猛 曹志贱 李文鑫 毛歆 王昆 蒋达和
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蝎毒素 BmαTX14 基因组织结构 毕赤酵母 真核表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 853-857
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4212字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.001

摘要

以东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch,BmK)BmαTX14全长cDNA序列设计引物,克隆BmαTX14成熟肽,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,转化酵母,诱导表达.Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于培养上清中,诱导84h时的表达量达到高峰,约为120mg/L.通过Ni金属螯合层析柱亲和层析、聚乙二醇沉淀、凝胶分子筛层析获得纯化的rBmαTX14融合蛋白,经毒性实验表明,具有明显的抗昆虫活性.同时以蝎基因组总DNA为模板进行PCR扩增,得到BmαTX14基因克隆,序列分析显示:BmαTX14在编码信号肽的基因序列中有1个长408bp的内含子,其基因组织结构具有α型Na+通道毒素的特征.从功能活性和基因组织结构两个角度证实BmαTX14为α型№+通道毒素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋达和	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	18	91	5.0	8.0
2	毛歆	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	13	53	4.0	6.0
3	李文鑫	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	71	338	11.0	15.0
4	曹志贱	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	17	55	4.0	6.0
5	王昆	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	5	30	2.0	5.0
6	吕猛	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	2	5	2.0	2.0