链霉菌来源的UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶性质研究

• 作者: 姜蓉 张天宇 李元 王玲燕
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 链霉菌 差向异构酶 表达 依博素生物合成
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 881-884
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3276字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.06.013

摘要

经同源性比较,链霉菌139(Streptomyces sp.139)产生胞外多糖依博素的生物合成基因簇中ste19 基因编码的蛋白Ste19与UDP-葡萄糖-4-差向异构酶有较高同源性.将ste19 基因克隆至质粒pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达.产生的可溶性Ste19重组蛋白,占细胞总蛋白的26%,说明该基因高GC含量(73.8%)及第三位碱基偏向使用GC(96.2%)并未影响其高效表达.SDS-PAGE结果显示重组蛋白的分子量约37kD,与理论推测值基本相同.经亲和层析纯化后得到了较高纯度的重组蛋白,经HPLC分析纯度为92.9%.酶活性分析表明:Ste19蛋白可将UDP-葡萄糖转化为UDP-半乳糖,因此,Ste19蛋白是UDP-葡萄糖-4-差向异构酶,它可能参与了依博素的生物合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李元	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	25	115	6.0	9.0
2	张天宇	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	1	6	1.0	1.0
3	王玲燕	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	4	53	3.0	4.0
4	姜蓉	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	7	27	3.0	5.0