Fractalkine基因真核表达质粒的构建及其在小鼠肝癌细胞中的表达

• 作者: 任红 兰英华 唐俐 彭明利 曾彦 胡鹏
• 来源期刊: 西南师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: fractalkine MM45T.Li细胞 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 页码范围: 122-125
• 页数: 4页
• 分类号: R730.2
• 字数: 2704字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5471.2005.01.028

摘要

为克隆小鼠趋化因子Fractalkine(FK)基因,构建真核表达质粒,并在小鼠肝癌细胞中表达,用以进行肿瘤的基因治疗,用RT-PCR法,从小鼠乳腺癌细胞D2F2扩增FK的cDNA,插入pCR2.1 TOPO载体,测序证实后,将其亚克隆至质粒pIRES中构建FK真核表达载体;用脂质体将重组质粒转染小鼠肝癌MM45T.Li细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR和免疫化学方法鉴定转染细胞中FK基因的表达.结果表明:经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,RT-PCR和免疫化学方法证明转基因MM45T.Li细胞克隆中存在小鼠FK基因的表达.