人源性MIF cDNA的克隆及其原核高效表达的研究

• 作者: 刘进军 李鹏 潘自铁 胡川闽 郭鹰
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: hMIF 乳腺癌 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 938-941
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11|R394-33|R394.2
• 字数: 3147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.10.002

摘要

目的克隆人MIF cDNA并构建其高效原核表达载体,表达和纯化得到高纯度的可溶性hMIF蛋白.方法经RT-PCR从人乳腺癌细胞株MDA-MB453中扩增到hMIF cDNA,并克隆到原核表达载体pET11b中.测序验证后将其转入大肠杆菌BL21中表达,最后经离子交换和疏水层析法纯化hMIF蛋白.结果克隆到的hMIF cDNA与Genebank已发表的序列完全一致,纯化得到的产物经Western blotting鉴定证实为hMIF蛋白.结论应用基因重组技术成功构建了pET11b/hMIF重组质粒,在大肠杆菌中实现了高效表达;纯化到高纯度的可溶性hMIF蛋白,为治疗性抗hMIF抗体的研究创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李鹏	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	67	677	9.0	24.0
2	胡川闽	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	56	209	7.0	11.0
3	郭鹰	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	12	41	3.0	5.0
4	刘进军	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	1	1	1.0	1.0
5	潘自铁	第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室	4	7	2.0	2.0