人La蛋白突变体表达质粒的构建及诱导表达纯化

• 作者: 刘皋林 孙静慧 张慧 缪海均 谭龙益 黄鹰
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人La蛋白 突变 质粒
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 892-895
• 页数: 4页
• 分类号: R373.21
• 字数: 3579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2005.08.019

摘要

目的:构建人La蛋白(human La protein,hLa)突变体表达质粒,并在大肠杆菌中表达野生型La蛋白及各突变体.方法:利用定点突变技术,对野生型人La蛋白的原核表达质粒pET28b-hLa进行定向缺失突变,将得到的3个突变体Mu1(A366)、Del1(A235～276)、Del2(A119～150)分别克隆至pET28b中,获得野生型人La蛋白突变体的表达质粒,并在BL21(DE3)和Rosetta2两种不同宿主菌中和不同浓度的IPTG诱导条件下进行蛋白表达水平的比较.结果:所获得的人La蛋白突变体的基因编码序列经测序符合序列设计的要求,表达产物经SDS-PAGE分析可见,在相对分子质量47 000处出现一明显条带,与预期的相对分子质量一致.结论:三个位点的序列改变并没有明显影响hLa蛋白的表达,在补充密码子的宿主菌Rosetta2中的表达量优于宿主菌BL21(DE3).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘皋林	第二军医大学长征医院药学部	85	665	14.0	20.0
2	缪海均	第二军医大学长征医院药学部	23	136	8.0	10.0
3	张慧	第二军医大学长征医院实验诊断科	39	152	6.0	12.0
4	谭龙益	第二军医大学长征医院实验诊断科	17	44	4.0	6.0
5	孙静慧	第二军医大学长征医院药学部	7	33	3.0	5.0