阴沟肠杆菌UW4菌株ACC脱氨酶基因的克隆、序列分析及原核表达

• 作者: 丁小维 刘飞虎 梁雪泥 黄海泉 黄美娟
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 阴沟肠杆菌 UW4菌株 ACC脱氨酶 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 952-956
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.06.025

摘要

从阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)UW4菌株提取细菌总DNA,根据已报道的阴沟肠杆菌ACC脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid deaminase)基因序列设计简并引物,通过PCR扩增获得1条约1.02 kb特异片段,把该片段连接到pGEM-Tvector上进行测序.序列分析结果表明,该基因编码区全长为1 017 bp,共编码338个氨基酸残基,与报道的序列相比仅存在8个核苷酸的差异,同源性达99.1%;将其翻译成氨基酸序列后发现,仅引起了4个氨基酸残基的变化,氨基酸同源性为98.2%.利用DNASIS软件对蛋白质二级结构进行分析比较,发现其蛋白质二级结构及其单元与报道的序列完全一致.将其插入原核表达载体pET-28b进行诱导表达,发现其表达蛋白在分子量约39 kD处比对照多出一明显条带;经Western blot分析检测,发现此带即为His-ACDS融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄美娟	西南林学院园林学院	16	95	6.0	9.0
2	黄海泉	云南大学生命科学学院	21	103	6.0	9.0
4	刘飞虎	云南大学生命科学学院	132	1837	21.0	37.0
7	丁小维	云南大学生命科学学院	6	86	5.0	6.0
8	梁雪泥	云南大学生命科学学院	1	5	1.0	1.0