MGP基因的重组及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 廖二元 文建新 杨雅 王平芳
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MGP 基因重组 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 354-356
• 页数: 3页
• 分类号: R68
• 字数: 2768字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2006.04.009

摘要

目的 重组骨质疏松候选基因基质Gla蛋白(MGP)基因使其蛋白在大肠杆菌中高效表达.方法 利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从正常人肺组织总RNA中扩增出MGP基因cDNA序列,与克隆pGEM-Teasy载体相连,测序为完整的编码序列后与表达载体pTrcHisB构建重组体,转化入大肠杆菌Top 10后用IPTG诱导,Western bloting证实蛋白表达.结果 克隆至pGEM-Teasy载体及pTrcHisB载体中的MGP基因cDNA序列与基因库完全一致.转入大肠杆菌后经IPTG诱导有蛋白的表达,Western bloting证实诱导后2、3、4 h蛋白的表达量显著增加.结论 成功重组的人MGP基因,重组体在大肠杆菌内能成功高效地表达.IPTG诱导后蛋白的表达为时间依赖性.