介导MDR1的RNAi腺病毒载体的构建

• 作者: 张志云 张有顺 戴宗晴 王菊 邹灿 郑启昌 黄玲
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi 肝癌细胞 多药耐药基因 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 798-801
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3234字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2006.11.006

摘要

目的 介导MDR1的RNAi腺病毒载体,探讨RNA干扰MDR1基因对人肝癌细胞的作用.方法 根据MDR1mRNA序列构建表达MDR1mRNA特异的shRNA的腺病毒穿梭质粒pshuttle-MDR1.与腺病毒载体体内重组为pAd-MDR1后转染人肝癌细胞SMMC-7721,以FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率,以共聚焦显微镜检测细胞内Rh123的潴留,Western Blot检测P-gp蛋白量的变化.结果 构建成pshuttle-MDR1经限制性酶切和PCR证实与设计一致,将pAd-MDR1转染肝癌细胞SMMC-7721后,FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率为22.9%和30.8%,远低于对照组(85.8%).Western Blot经病毒感染的SMMC-7721/R的P-gp含量明显低于对照SMMC-7721/R,而与SMMG-7721/S细胞接近.结论 成功构建了pshuttle-MDR1腺病毒载体,并有效干扰了肝癌细胞细SMMC-7721 MDR1的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张有顺	郧阳医学院附属东风总医院肝胆外科研究所	23	94	6.0	8.0
2	戴宗晴	郧阳医学院附属东风总医院肝胆外科研究所	18	52	4.0	6.0
3	黄玲	郧阳医学院附属东风总医院肝胆外科研究所	9	56	4.0	7.0
4	王菊	郧阳医学院附属东风总医院肝胆外科研究所	10	53	3.0	7.0
5	邹灿	郧阳医学院附属东风总医院肝胆外科研究所	8	45	3.0	6.0