生长抑制因子1基因核定位序列-绿荧光蛋白融合表达载体的构建及表达

• 作者: 于士柱 周宏旭 孙兆明 安同岭 康春生 张文治 黄慧玲
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生长抑制因子1基因 pEGFP-C1绿荧光蛋白表达载体 MRC-5细胞系 质粒 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 临床遗传学研究
• 页码范围: 330-332
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2507字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2006.03.022

摘要

目的构建p33ING1b核定位序列(nuclear locating sequence, NLS)-绿荧光蛋白融合表达载体,将其转染到人胚肺纤维母细胞系MRC-5,建立稳定表达该融合蛋白的细胞模型.方法应用逆转录PCR获得p33ING1b的NLS序列,然后将NLS序列插入绿荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1的多克隆位点,构建pEGFP-C1-NLS-绿荧光蛋白融合表达载体,再用此载体转染MRC-5细胞系,观察活细胞绿荧光蛋白的亚细胞定位.结果成功构建了pEGFP-C1-NLS-绿荧光蛋白融合表达载体,由该载体表达的绿荧光蛋白-NLS肽段融合蛋白产生的绿色荧光信号全部定位于胞核部位,而空载体转染的细胞表达的绿色荧光蛋白,绿色荧光信号定位于细胞浆中.结论在活细胞内,生理情况下P33ING1b完全定位于细胞核,并且在其亚细胞定位的转运过程中,NLS肽段起着决定性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄慧玲		40	185	7.0	10.0
2	张文治		55	342	11.0	15.0