钩端螺旋体Lipl21基因真核质粒构建及在HeLa细胞的表达

• 作者: 何汉江 刘传爱 占利生 李丽华 汪文玉 谭立志
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 外膜脂蛋白 DNA疫苗 真核表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 941-943
• 页数: 3页
• 分类号: R377.1
• 字数: 3002字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2006.06.001

摘要

目的构建钩端螺旋体外膜脂蛋白Lipl21基因片段的真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染HeLa细胞,探讨其在体外真核细胞中的表达情况,为寻找新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子提供实验依据. 方法应用PCR技术从钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组模板中扩增Lipl21基因,纯化回收后克隆入pUCM-T载体,再亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),运用脂质体2000将重组体pcDNA3.1(+)/LipL21转染入HeLa细胞,免疫组化法观察目的基因的表达. 结果双酶切及测序鉴定证明成功构建LipL21真核表达重组体pcDNA3.1(+)/LipL21,DNA测序显示重组质粒含有561bp的目的基因片段,读码框架正确,无碱基错配及移码突变.重组质粒pcDNA3.1(+)/LipL21在体外HeLa细胞中能有效表达目的蛋白LipL21. 结论成功构建了钩端螺旋体Lipl21基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Lipl21,且能够在体外真核细胞中表达,为进一步筛选新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子奠定了一定的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘传爱	南华大学病原生物学研究所	28	61	5.0	6.0
2	谭立志	南华大学病原生物学研究所	47	128	6.0	8.0
3	何汉江	湘南学院医学部	38	111	6.0	8.0
4	李丽华	湘南学院医学部	22	104	6.0	9.0
5	汪文玉	南华大学病原生物学研究所	3	1	1.0	1.0
6	占利生	南华大学病原生物学研究所	9	10	2.0	2.0