大肠杆菌植酸酶appA的融合表达及耐热性研究

• 作者: 刘谊 徐文华 徐辉 曹毅 董明奇 贺顺姬 雷高鹏
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 植酸酶 重组appA 耐热性
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 页码范围: 445-450
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 4271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2006.02.040

摘要

提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因appA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1440个核苷酸.将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA.对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG诱导表达植酸酶,表达量达到10%以上.在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度.发现融合表达的植酸酶的耐热性得到提高.