猪Sar1b基因的分子克隆、序列分析及原核表达

• 作者: 余梅 刘榜 朱猛进 李奎 樊斌 熊统安 王学敏 赵书红
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 Sarlb基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 625-629
• 页数: 5页
• 分类号: S828.2
• 字数: 3518字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.07.001

摘要

根据GenBank已发表的猪Sarlb基因序列(GenBank登录号:AY819557)设计1对引物,以猪肝脏组织总RNA的反转录产物为扩增模板,用RT-PCR方法扩增出猪Sarlb基因cDNA全长编码区,经过EcoRI-SalI双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-Sarlb重组原核表达载体.将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol/L ITPG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小大约为26 ku,与预期表达蛋白大小一致.Western blot检测显示该蛋白为His融合蛋白,表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白.猪Sarlb基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础.