6His-VP3融合蛋白的表达、纯化及其捕获细胞中相关蛋白的初步探讨

• 作者: 孙军 宗义强 屈伸 彭冬君 毕昊 狄勇 王阿慧 田俊
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 凋亡素 VP3融合蛋白 相关蛋白 肿瘤特异性
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 112-115
• 页数: 4页
• 分类号: Q71
• 字数: 3351字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.02.005

摘要

目的 研究人肝癌细胞HepG2与人胎肝细胞L-02中与VP3蛋白相互作用的蛋白组分,以探讨VP3特异性诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法 采用PCR方法克隆vp3的DNA片段,将其插入质粒pET-28a(+)构建含6个组氨酸标签6His-VP3融合蛋白的原核表达载体.利用亲和层析技术制备纯化的6His-VP3融合蛋白作为诱饵,分别从肿瘤细胞HepG2及正常细胞L-02的总蛋白中,通过pull-down技术捕获与VP3相互作用的特异性蛋白质组分.结果 获得了高纯度的6His-VP3融合蛋白;以其作为诱饵从HepG2细胞和L-02细胞中捕获到的与VP3作用的相关蛋白质组分存在差异.结论 肿瘤细胞HepG2及正常细胞L-02中,与VP3作用蛋白的差异与其在不同细胞中的生物学行为相对应.