人黑色素浓集激素1型受体真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立

• 作者: 宋方洲 易发平 杨俊霞 石华 袁成福 陈济 马永平 魏丽丽
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,黑色素浓集激素,1型 真核表达载体 CHO细胞 基因表达 转染
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.01.002

摘要

目的 构建人黑色素浓集激素1型受体(MCHR1)真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR1的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR1真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达了目的基因.结论 真核表达载体的构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR1功能奠定了良好的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马永平	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	35	170	6.0	10.0
2	魏丽丽	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	5	9	2.0	2.0
3	易发平	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	45	167	7.0	10.0
5	杨俊霞	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	14	69	4.0	8.0
6	陈济	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	2	26	1.0	2.0
7	石华	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	3	14	2.0	3.0