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摘要:
目的 构建野生型和突变型PSD-95(postsynaptic density protein 95)的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞系中表达.方法 采用RT-PCR扩增大鼠PSD-95的cDNA,以PSD-95-GW1为模板,以PCR扩增PSD-95序列的突变体Myc-ΔSG(-SH3-GK)和Myc-ΔG(-GK),分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+).以脂质体法将重组质粒转入COS-7细胞,免疫印迹法鉴定PSD-95及其突变体的蛋白表达.结果 限制性内切酶酶切和测序结果表明,扩增出的野生型/突变型PSD-95基因完全正确;免疫印迹法检测表明,转染的重组质粒能在COS-7细胞中高效表达.结论 构建的PSD-95-pcDNA3.1(+)、Myc-ΔSG-pcDNA3.1(+)和Myc-ΔG-pcDNA3.1(+)重组载体在COS-7细胞系中高效地表达,为深入研究PSD-95在缺血性脑损伤中的作用及机制打下基础.
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文献信息
篇名 野生型/突变型PSD-95真核表达载体的构建及其表达
来源期刊 免疫学杂志 学科 医学
关键词 PSD-95 真核表达 COS-7细胞
年,卷(期) 2007,(1) 所属期刊栏目 基础免疫学
研究方向 页码范围 20-22
页数 3页 分类号 Q786|R743.3
字数 2314字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-8861.2007.01.006
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 胡书群 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室 28 126 4.0 10.0
2 侯筱宇 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室 24 97 5.0 9.0
3 齐静 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室 4 18 2.0 4.0
4 邰剑敏 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室 1 4 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
PSD-95
真核表达
COS-7细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
免疫学杂志
月刊
1000-8861
51-1332/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩
78-32
1985
chi
出版文献量(篇)
4652
总下载数(次)
25
总被引数(次)
27928
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导