重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选

• 作者: 夏春 姜平 方青美 李云岗 李新生 王钦富 迟彦 高凤山
• 来源期刊: 自然科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: SLA-I单链复合体 T细胞表位 口蹄疫病毒
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 学术论文
• 页码范围: 724-730
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 字数: 5888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-008X.2007.06.004

摘要

目前,没有研究猪SLA-I类复合体限制性表位的系统.为了构建猪的SLA-I类复合体,研究其相应重要病毒的限制性表位,亚克隆猪主要组织相容性复合体重链基因SLA-2胞外区和轻链基因β2m成熟肽区,利用一富含甘氨酸和丝氨酸的Linker(G4S)3连接两个基因,通过SOE PCR体外构建了猪可溶性的单链复合体SC-SLA-I[SLA-2-(G4S)3-β2m],计算机方法设计3类口蹄疫病毒VP1蛋白的T细胞表位,经化学合成,分别命名为PepⅠ(FMDV/VP126-34)、Pep Ⅱ(FMDV/VP1157-165)和Pep Ⅲ(FMDV/VP145-53),用以结合单链复合体蛋白SC-SLA-I.酸洗脱结合质谱法测定SC-SLA-I结合表位,同时设定非相关蛋白和多肽的对照试验.结果显示,Pep Ⅰ和Pep Ⅱ均能和SC-SLA-I结合,而Pep Ⅲ及非相关多肽不能结合,对照蛋白MBP的肽结合试验显示阴性.结果表明,多肽Pep Ⅰ和Pep Ⅱ属于SLA-I类限制性表位.