抗HIV-1白喉免疫毒素的构建及原核表达

• 作者: 于芳 佟敬山 刘玉生 李昌 金宁一 金洪涛
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 白喉毒素 基因克隆 免疫毒素 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 753-755
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|R392.11
• 字数: 3261字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.05.008

摘要

目的:构建重组DTA-hS120融合基因表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:通过PCR扩增,获得只含白喉毒素(DT)活性部位(DTA)的基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹分析鉴定.结果:酶切及DNA序列测定鉴定质粒构建正确;SDS-PAGE和Western印迹分析证实,可表达出相对分子质量为54 000的融合蛋白,与DTA-hS120融合蛋白的分子量一致;经凝胶成像分析,其表达量约占菌体总蛋白的23%,表达形式主要为包涵体.结论:构建了DTA-hS120重组表达质粒,并获得了高效表达,为进一步研究抗HIV-1治疗药物奠定了基础.