MMP-2基因RNAi重组慢病毒的构建

• 作者: 刘鸣 姜二华 孙亚男 田霖丽 金德均
• 来源期刊: 哈尔滨医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 MMP-2 肿瘤 慢病毒
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 521-523
• 页数: 3页
• 分类号: R739
• 字数: 2708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1905.2007.06.001

摘要

目的 构建MMP-2基因RNAi重组慢病毒,以便客观研究该基因的作用.方法 筛选确定的MMP-2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)的pLVTHM载体连接产生LV2siMMP-2慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用LV2siMMP-2,pCMV2dR8.74和pMD2G3质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 PCR和测序证实,成功构建MMP-2 siRNA的慢病毒载体LV2siMMP-2,包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为8×1010 TU/L.结论 成功构建人MMP-2基因RNAi慢病毒载体,为后期研究MMP-2基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金德均	哈尔滨医科大学第二临床医学院耳鼻咽喉科	45	179	6.0	10.0
2	孙亚男	哈尔滨医科大学第二临床医学院耳鼻咽喉科	40	178	7.0	11.0
3	田霖丽	哈尔滨医科大学第二临床医学院耳鼻咽喉科	21	45	4.0	5.0
4	刘鸣	哈尔滨医科大学第二临床医学院耳鼻咽喉科	44	131	6.0	9.0