小鼠IL-5真核表达质粒的构建和体外表达

• 作者: 宿静梅 林映莹 王华 王才春 谭光宏 黄用豪 黄风迎
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素-5 真核表达 质粒 基因工程
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1289-1290,1339
• 页数: 3页
• 分类号: Q753
• 字数: 3199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2007.08.005

摘要

目的 构建小鼠白细胞介素-5(IL-5)基因真核表达质粒,了解该质粒在真核细胞COS细胞中有效表达情况.方法 以含有小鼠IL-5基因的克隆质粒pORF9-mIL-5为模板,通过PCR扩增小鼠IL-5全段基因,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入peDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-m IL-5,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染COS细胞,用Western Blot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质.结果 成功扩增了小鼠IL-5全长基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA-m IL-5,Westem blot方法证实该质粒能在COS真核细胞中有效表达小鼠IL-5目的蛋白.结论 成功构建了小鼠IL-5基因的真核表达质粒载体,为进一步研究IL-5的新功能和免疫基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭光宏	海南医学院海南省热带病重点实验室	43	127	8.0	9.0
2	黄风迎	海南医学院海南省热带病重点实验室	26	48	4.0	5.0
3	王才春	海南医学院海南省热带病重点实验室	16	35	3.0	5.0
7	林映莹	海南医学院海南省热带病重点实验室	17	38	3.0	5.0
8	王华	海南医学院海南省热带病重点实验室	19	47	3.0	6.0
9	黄用豪	海南医学院海南省热带病重点实验室	25	52	3.0	6.0