含信号肽的Mtb8.4/hIL12嵌合基因真核表达质粒的构建及在COS-7细胞中的表达

• 作者: 任红 李晖 李榕 钟森
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核病 MS hIL-12 嵌合基因
• 年，卷（期）: 2007,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3227-3230
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-8507.2007.17.011

摘要

[目的]克隆结核分枝杆菌含信号肽的Mtb8.4(MS)/hiL12嵌合基因,导入真核表达载体pCI-neo,并在COS-7细胞中进行表达.[方法]首先以pcDNA3.1(十)-含信号肽的Mtb8.4(pMS)为模板,经聚分酶链反应(PCR)扩增出MS-linker基因,与pCI-neo载体进行连接重组,构建成pCI-neo-MS-linker(pMSL)重组质粒,然后以pORF-hIL12质粒为模板,经PCR扩增出hIL-12基因,将hIL-12基因与pMSL质粒进行连接重组,构建成MS/hIL12嵌合基因真核表达质粒,用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测定等多种分子生物学方法进行鉴定:重组嵌台质粒转染COS-7细胞后,用RT-PCR方法鉴定MS/hIL12嵌合基因在转录水平的表达情况.[结果]MS/hIL12嵌合基因重组真核表达质粒经证实构建成功;转染COS-7细胞后,MS/hIL12嵌合基因在转录水平成功表达.[结论]MS/hIL12嵌合基因重组真核表达质粒的成功构建及在COS-7细胞中的成功表达,为进一步研究其免疫保护效果及制备结核病MS/hIL12嵌合基因疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任红	重庆医科大学第二临床学院感染科	240	1961	23.0	35.0
2	钟森		82	309	8.0	13.0
3	李晖	军事医学科学院野战输血研究所一室	10	19	2.0	3.0