结核杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因真核表达质粒的构建与表达

• 作者: 任红 李晖 李榕 钟森
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核病 Mtb8.4 hIL-12 嵌合基因
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 213-217
• 页数: 5页
• 分类号: R378.91
• 字数: 4010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.03.006

摘要

目的克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因,导入真核表达载体pCI-neo,并在真核细胞中进行表达.方法采用基因工程技术,首先以pcDNA3.1(+)-Mtb8.4为模板,经聚合酶链反应(PCR)扩增出Mtb8.4-linker基因,与pCI-neo载体进行连接重组,构建成pCI-neo-Mtb8.4-linker(pML)重组质粒,然后以pORF-hIL12质粒为模板,经PCR扩增出hIL-12 基因,将hIL-12 基因与pML质粒进行连接重组,构建成Mtb8.4/hIL12嵌合基因真核表达质粒,用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测定等多种分子生物学方法进行鉴定;重组嵌合质粒转染COS-7细胞后,用RT-PCR方法鉴定Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平的表达情况.结果 Mtb8.4/hIL12嵌合基因重组真核表达质粒经证实构建成功;转染COS-7细胞后,Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平成功表达.结论 Mtb8.4/hIL12嵌合基因重组真核表达质粒的成功构建及在COS-7细胞中的成功表达,为进一步研究其免疫保护效果及制备结核病Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任红	重庆医科大学第二临床学院感染科	240	1961	23.0	35.0
2	钟森	泸州医学院附属医院感染病科	37	97	5.0	8.0
3	李晖	泸州医学院附属医院感染病科	24	68	5.0	7.0
4	李榕		6	2	1.0	1.0