HIV-1 Tat真核表达载体的构建及在内皮细胞的表达

• 作者: 刘朝奇 史继静 杨凡 柳发勇 韩钰
• 来源期刊: 实用医学进修杂志
• 关键词: HIV Tat基因 真核表达载体 RT-PCR HIV-1 LTR-Luc报告基因
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 学术窗口
• 页码范围: 146-149,168
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的:构建HIV-1 Tat真核表达质粒,为研究Tat在HIV-1致病机制中的作用奠定实验基础.方法:以pCV1(tat and rey)质粒为模板,用PCR方法扩增HIV-1 Tat基因,克隆至P cDNA3.1(+)表达载体,酶切及测序鉴定重组体.重组质粒转染ECV304细胞,用RT-PCR、转染HIV-1 LTR荧光报告基因的方法检测tat基因的表达及活性.结果:经酶切及测序鉴定,成功构建pcDNA3.1(+)-Tat重组质粒.重组体转染ECV304细胞,建立稳定表达细胞株,应用RT-PCR可检测到Tat基因mRNA的表达;荧光仪检测Tat蛋白可明显促进荧光素酶在ECV304细胞内的表达.结论:成功构建HIV-1Tat真核表达载体,并建立了HIV-1 Tat内皮细胞稳定表达细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩钰	三峡大学分子生物学研究所	71	175	7.0	9.0
2	刘朝奇	三峡大学分子生物学研究所	171	552	10.0	15.0
3	史继静	三峡大学分子生物学研究所	19	94	6.0	9.0
4	杨凡	三峡大学分子生物学研究所	22	47	4.0	6.0
5	柳发勇	三峡大学分子生物学研究所	6	15	2.0	3.0