罗非鱼免疫前后白细胞cDNA差减文库的构建及其表达序列标签初步分析

• 作者: 余晓丽 徐增辉 李莉萍 李超 梁万文 甘西 陈明 雷爱莹 黄维义
• 来源期刊: 广西水产科技
• 学科: 农学
• 关键词: 罗非鱼 链球菌 疫苗 差减文库 免疫相关基因
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S917.4
• 语种: 中文

摘要

为筛选得到罗非鱼白细胞免疫相关基因,促进鱼类免疫防治进展,本研究应用抑制性差减杂交(SSH)技术成功构建了罗非鱼链球菌疫苗免疫前后正、反两个白细胞cDNA差减文库,富集了免疫过程中表达谱发生变化的白细胞基因.随机挑选阳性克隆PCR检测,显示插入片段在300~750bp.正反文库各随机挑选300个阳性克隆(共600个克隆)进行测序及EST初步分析.正库筛选得到18个免疫期间表达丰度上调基因,其中2个与罗非鱼已知基因具有相似性,6个与其他鱼类已知基因相似,其他6个与其他物种已知基因具有相似性,4个为未知新基因.负库筛选得到22个免疫期间表达丰度下调的基因,其中4个与罗非鱼已知基因具有相似性,5个与其他鱼类已知基因相似,6个与其他物种已知基因具有相似性,7个为未知新基因.随着序列的进一步分析及利用RACE等技术得到罗非鱼抗菌或免疫相关全基因,深入开展鱼类功能基因研究奠定良好的基础.