水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1的原核表达、纯化及鉴定

• 作者: 万建民 刘玲珑 江玲 汪仁 沈文飚 翟虎渠
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻种子 脂氧合酶 原核表达 纯化 鉴定
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 页码范围: 118-124
• 页数: 7页
• 分类号: Q945.2|S511.03
• 字数: 5659字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-7216.2008.02.002

摘要

脂氧合酶是动植物体内催化脂质降解的关键酶,也是茉莉酸合成途径的第一个关键酶.以先前克隆到的水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到大肠杆菌表达载体pET30a(+)上并转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌.经过20℃条件下的IPTG诱导,OsLOX1重组蛋白在BL21(DE3)菌株中得到表达,经生化特性分析,发现该重组蛋白具有LOX催化活性,其最适pH和温度分别为4.8和30℃.该重组子可进一步应用于体外生产茉莉酸和研究植物种子LOX结构与功能的关系.