pEGFP-N1/PDX1真核载体的构建与表达

• 作者: 唐小龙 张洹 朱康儿 郭敏
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰腺十二指肠同源框蛋白1 质粒 转录因子 内切酶
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 121-124
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2008.02.004

摘要

目的: 构建胰腺十二指肠同源框蛋白1 (pancreatic and duodenal homeobox factor 1, Pdx1)转录因子真核表达质粒,并检测其在真核细胞中的表达能力及其生物活性.方法:以人胚胎胰腺组织基因组的mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1基因编码序列,克隆到真核表达载体pEGFP-N1的多克隆位点中,构建pEGFP-N1/Pdx1真核表达质粒,并转染L02细胞,用RT-PCR、免疫组化、间接荧光法和Western Blot检测目的基因表达情况.结果:酶切与测序结果表明目的基因序列克隆正确;RT-PCR检测目的基因Pdx1 mRNA在靶细胞L02中表达;免疫组化和间接荧光结果证实Pdx1主要存在于细胞核内;Western blot检测到细胞核内Pdx1目的蛋白.结论:完成人Pdx1基因克隆,成功构建了目的基因Pdx1真核表达载体,并在L02细胞中获得有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洹	暨南大学医学院血液病研究所	219	1146	17.0	21.0
2	唐小龙	暨南大学医学院血液病研究所	28	154	8.0	10.0
3	朱康儿	暨南大学医学院血液病研究所	68	177	6.0	10.0
4	郭敏	暨南大学医学院血液病研究所	9	69	5.0	8.0