弓形虫P30基因的克隆及其在E．coli中的融合表达

• 作者: 曲道峰 杜爱芳 王素华 蔡渭明
• 来源期刊: 检验检疫科学
• 学科: 农学
• 关键词: 弓形虫 P30基因 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 8-10
• 页数: 3页
• 分类号: S852

摘要

【目的】研究弓形虫P30基因的克隆及其在E．coli中的融合表达。【方法】参照弓形虫P30序列设计引物，应用PCR技术扩增出弓形虫RH株P30的部分基因，将扩增产物克隆到pUCm—T载体，测序正确后再亚克隆到质粒pET-30a中，得到重组质粒pET-30a—P30并将其转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE和Westen-blot分析。【结果】P30基因在E．coli中得到了高效表达，表达的融合蛋白的分子量在30kDa附近，可以被鼠抗Toxoplasma gondii阳性血清特异性识别。【结论】该研究为Toxoplasma gondii的检测和疫苗研制及综合防制奠定了基础。