口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的可溶性表达与反应原性的鉴定

• 作者: 刘在新 卢曾军 曹轶梅 祝秀梅 胡永浩 马江涛
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 非结构蛋白3AB ELISA
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.01.003

摘要

设计特异性引物扩增得到完整的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3AB基因,定向克隆到表达载体pET-30a中,获得了重组质粒pET-3AB,并转化大肠杆菌(Eschenchia coli)BL21(DE3).重组菌分别在37℃和28℃条件下诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,观察到37℃培养条件下目的蛋白形成包涵体,在28℃条件下培养目的蛋白以可溶性的形式表达.Western blot分析表明,表达的目的蛋白能与FMDV感染牛血清发生特异性反应.以纯化的3AB蛋白作为抗原,采用间接ELISA模式检测了部分FMDV感染动物血清和健康动物血清,证明表达蛋白与FMDV感染血清有很好的反应而与健康动物血清无反应.