1pcDNA3.1-Ercc6l真核表达载体的构建及在P19细胞内的表达

• 作者: 张庆 陈祥贵
• 来源期刊: 泰山医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Ercc6l 真核表达 P19胚胎癌细胞 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 164-168
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 4075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7115.2008.03.002

摘要

目的 构建Ercc6l的正、反义真核表达载体,并在P19胚胎癌细胞内瞬时表达,在细胞学水平对基因功能进行初步研究.方法 KpnⅠ/XhoⅠ双酶切pGEM-T-Ercc6l获得目的基因Ercc6l,将其克隆到同样经过双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+) 和pcDNA 3.1(-) Myc His6,重组质粒pcDNA3.1(+/-)-Ercc6l经菌落PCR和双酶切鉴定;脂质体介导法体外瞬时转染正义载体至P19细胞,RT-PCR检测基因在细胞内的表达活性情况.结果 重组质粒经菌落PCR和KpnⅠ/XhoⅠ双酶切鉴定,表明真核表达载体构建正确;脂质体介导法瞬时转染正义载体至P19细胞后,检测表明转染细胞能够表达Ercc6l.结论 成功构建了Ercc6l正、反义真核表达载体,其正义载体转染真核细胞后能在其中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈祥贵	西华大学生物工程学院	80	467	14.0	18.0
2	张庆	泰山医学院生物科学系	2	1	1.0	1.0